KAPILARNA ELEKTROFOREZA PDF

Afinitnн elektroforйza 1. Volnб elektroforйza V klasickй tzv. Elektroforйza na nosiинch Aby se odstranily nedostatky volnй elektroforйzy, tj. Rozhodujнcн vliv na stupeт disociace skupin separovanэch lбtek a tedy i na velikost jejich nбbojemб pH prostшedн. Naopak lбtky nesoucн nбboje se budou pohybovat ve smмru elektrody s opaиnэm nбbojem, tedy kationty ke katodм a anionty k anodм. Mб-li se tedy separovanб smмs dмlit pouze na zбkladм velikosti nбboujщ, nesmн gel brбnit molekulamб v jejich prщchodu.

Author:Mejora Mazuran
Country:China
Language:English (Spanish)
Genre:History
Published (Last):28 June 2009
Pages:447
PDF File Size:8.68 Mb
ePub File Size:10.99 Mb
ISBN:873-5-94313-836-3
Downloads:55640
Price:Free* [*Free Regsitration Required]
Uploader:Kigatilar



Afinitnн elektroforйza 1. Volnб elektroforйza V klasickй tzv. Elektroforйza na nosiинch Aby se odstranily nedostatky volnй elektroforйzy, tj. Rozhodujнcн vliv na stupeт disociace skupin separovanэch lбtek a tedy i na velikost jejich nбbojemб pH prostшedн. Naopak lбtky nesoucн nбboje se budou pohybovat ve smмru elektrody s opaиnэm nбbojem, tedy kationty ke katodм a anionty k anodм.

Mб-li se tedy separovanб smмs dмlit pouze na zбkladм velikosti nбboujщ, nesmн gel brбnit molekulamб v jejich prщchodu. Experimentбlnн uspoшбdбnн elektroforйzy geleu je dvojнho typu. Rozdнl mezi obмma typy je v umнstnмnн vzorku. Elektroforetickй podmнnky se uspoшбdajн tak, aby separovanй lбtky postupovaly shora dolщ pH, polha obou elektrod. Tнmto zpщsobem dojde k oddмlenйmu jнmбnн jednotlivэch frakcн. Doobrйho vэsledku separace lze dosбhnout pouze tehdy. SDS je anionaktivnн detergent, kterэ nese pomмrnм vysokэ nбboj, a proto ve vazbм na bнlkovinu vyrovnбvб nбbojovй rozdнly bнlkovin a ty se pohybujн v gelu jen podle velikosti.

Experimentбlnм byla prokбzбna pшнmб ъmмrnost elektroforetickй pohyblivosti komplexщ SDS-bнlkovina v polyakrylamidovйm gelu a logaritmu relativnн molekulovй hmotnosti. Takto stanovenй hodnoty rel. Zatнmco elektroforйza na nosiинch se provбdн za konstantnнho pH, k separaci pшi izoelektrickй fokusaci dochбzн v gradientu pH, kterэ se ustavн mezi dvмma elektrodami.

Separovanб lбtka se pohybuje vlivem el. Tam ztratн nбboj, zastavн se a bude se v tomto bodм koncentrovat. Vlivem elektrickйho pole se bude A pohybovat v takovйm smмru, aby dosбhla pH rovnйho svйmu izoelektrickйmu bodu. Tam se zastvн ztratн nбboj a bude se koncentrovat.

Syntetickй amfolyty, kterй jsou pшipraveny tнmto zpщsobem, se nazэvajн amfolytovй nosiиe. Gradient pH se иasto tvoшн v hustotnнm gradientu sacharуzy, kterэ stabilizuje fokusovanй elektrolyty proti difuzi.

Vэhodnй je, kombinujeme-li pшi tom dvм navzбjem nezбvislй elektroforetickй metody napш. Nejprve se nechб probмhnout elektroforйza v trubiиce. Gel z trubiиky se pak podйlnм pшipolymeruje k pшipravenй desce PAA gelu a nechб se probмhnout v druhйm smмru po desce.

Provбdн se na desce. Jde o kombinaci dvou principщ: v jednom smмru se lбtky separujн podle nбboje, ve druhйm podle velikosti molekuly. Jde tedy o kombinaci dмlenн podle isoelektrickйho bodu a podle velikosti molekuly. Tomuto zpщsobu elektroforйzy se шнkб vysokoъиinnб kapilбrnн elektroforйza HPCE a provбdн se nмkolika zpщsoby - jako volnб elektroforйza, gelovб elektroforйza, ale i jako izoelektrickб fokusace. Volnб kapilбrnн elektroforйza free-zone capillary electrophoresis Provбdн se v otevшenй kapilбшe naplnмnй elektrolytem.

K separaci dochбzн kombinacн vlivu elektroforetickй migrace a elektroosmotickйho toku. Elektroforetickou migracн rozumнme pohyb nabitэch molekul v elektrickйm poli. Elelktroosmotickэ tok je tok elektrolytu zpщsobenэ nбbojem vnitшnн stмny kapilбry a aplikovanэm potenciбlem. Ve styku s elektrolytem majн silanovй skupiny podйl vnitшnн stмny kapilбry tendenci ionizovat a vytvбшet tak na rozhranн stмny kapilбry a elektrolytu elektrickou dvojvrstvu. Tak se vytvбшн elektroosmotickэ tok smмrem ke katodм.

Kapilбrnн elektroforйza Neutrбlnн molekuly se pшi volnй kapilбrnн elektroforйze neseparujн, ale pohybujн se jako jeden pбs. SDS k elektrolytu. Neutrбlnн molekuly majн k nabitэm micelбm rщznou afinitu a podle nн se bмhem elektroforйzy separujн. Tato technika je znбma jako micelбrnн elektrokinetickб kapilбrnн chromatografie MECC. Na velikost proudu mб vliv i koncentrace elektrolytu a rozmмry kapilбry.

CUVIELLO REFERENCE MANUAL PDF

Elektroforeza kapilarna

.

BASOHLI PAINTINGS PDF

Kapilarna elektroforeza

.

Related Articles